आवश्यक तेल थोक कारखाना | चीन आवश्यक तेल थोक निर्माता और आपूर्तिकर्ता

त्वचा और शरीर की देखभाल के लिए अरोमाथेरेपी शुद्ध प्राकृतिक नीलगिरी पत्ती आवश्यक तेल

निष्कर्षण या प्रसंस्करण विधि: भाप आसुत

आसवन निष्कर्षण भाग: पत्ती

देश की उत्पत्ति: चीन

अनुप्रयोग: फैलाना/अरोमाथेरेपी/मालिश

शेल्फ लाइफ: 3 वर्ष

अनुकूलित सेवा: कस्टम लेबल और बॉक्स या अपनी आवश्यकता के रूप में

प्रमाणन: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

नीलगिरी का तेल बलगम के साथ क्रिया करके उसे ढीला करता है जिससे सांस फूलने और अन्य श्वसन संबंधी समस्याओं से तुरंत राहत मिलती है। यह कीट विकर्षक के रूप में काम करने के लिए पर्याप्त शक्तिशाली है। अरोमाथेरेपी में उपयोग किए जाने पर, यह विचारों में स्पष्टता प्रदान करता है। इसके चिकित्सीय लाभ इसके रोगाणुरोधी, जीवाणुरोधी, एंटीसेप्टिक, ऐंठनरोधी और एंटीवायरल गुणों के कारण हैं। नीलगिरी के तेल का उपयोग विभिन्न प्रकार की त्वचा और स्वास्थ्य समस्याओं के लिए करें। इसमें यूकेलिप्टोल होता है जिसे सिनेओल भी कहा जाता है। यह यौगिक आपके संपूर्ण स्वास्थ्य और तंदुरुस्ती में सहायक होगा।

विवरण
अरोमाथेरेपी त्वचा देखभाल के लिए प्राकृतिक शुद्ध कार्बनिक लैवेंडर आवश्यक तेल

निष्कर्षण या प्रसंस्करण विधि: भाप आसवन

आसवन निष्कर्षण भाग: फूल

देश की उत्पत्ति: चीन

अनुप्रयोग: फैलाना/अरोमाथेरेपी/मालिश

शेल्फ लाइफ: 3 वर्ष

अनुकूलित सेवा: कस्टम लेबल और बॉक्स या अपनी आवश्यकता के रूप में

प्रमाणन: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

विवरण
त्वचा की देखभाल के लिए 100% शुद्ध प्राकृतिक ऑर्गेनिक मैगनोलिया ऑफिसमालिस कॉर्टेक्स ऑयल आवश्यक तेल

होउ पो की सुगंध तुरंत कड़वी और तीखी होती है, फिर धीरे-धीरे गहरी, चाशनी जैसी मिठास और गर्माहट के साथ खुलती है।

होउ पो का संबंध पृथ्वी और धातु तत्वों से है, जहाँ इसकी कड़वी गर्मी क्यूई और शुष्क नमी को कम करने में प्रबल रूप से कार्य करती है। इन गुणों के कारण, चीनी चिकित्सा में इसका उपयोग पाचन तंत्र में जमाव और कफ के जमाव के साथ-साथ फेफड़ों में जमा कफ के कारण होने वाली खांसी और घरघराहट को दूर करने के लिए किया जाता है।

मैगनोलिया ऑफिसिनैल्स एक पर्णपाती वृक्ष है जो सिचुआन, हुबेई और चीन के अन्य प्रांतों के पहाड़ों और घाटियों का मूल निवासी है। पारंपरिक चीनी चिकित्सा में इस्तेमाल होने वाली इसकी अत्यधिक सुगंधित छाल को अप्रैल से जून के दौरान इसके तनों, शाखाओं और जड़ों से छीलकर एकत्र किया जाता है। इसकी मोटी, चिकनी छाल, तेल से भरपूर, अंदर से बैंगनी रंग की होती है और इसकी चमक क्रिस्टल जैसी होती है।

चिकित्सक संचय को तोड़ने के उद्देश्य से मिश्रण में शीर्ष नोट पूरक के रूप में होउ पो को किंग पी आवश्यक तेल के साथ संयोजित करने पर विचार कर सकते हैं।

विवरण
OEM कस्टम पैकेज प्राकृतिक मैक्रोसेफाली राइज़ोमा तेल

एक प्रभावी कीमोथेरेपी एजेंट के रूप में, 5-फ्लूरोरासिल (5-FU) का व्यापक रूप से जठरांत्र संबंधी मार्ग, सिर, गर्दन, छाती और अंडाशय में घातक ट्यूमर के उपचार के लिए उपयोग किया जाता है। और 5-FU क्लिनिक में कोलोरेक्टल कैंसर के लिए पहली पंक्ति की दवा है। 5-FU की क्रियाविधि ट्यूमर कोशिकाओं में यूरैसिल न्यूक्लिक एसिड के थाइमिन न्यूक्लिक एसिड में परिवर्तन को रोकना है, फिर इसके साइटोटोक्सिक प्रभाव को प्राप्त करने के लिए डीएनए और आरएनए के संश्लेषण और मरम्मत को प्रभावित करना है (अफजल एट अल., 2009; डुक्रेक्स एट अल., 2015; लॉन्गली एट अल., 2003)। हालाँकि, 5-FU कीमोथेरेपी-प्रेरित दस्त (CID) भी पैदा करता है, जो सबसे आम प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं में से एक है जो कई रोगियों को परेशान करती है (फिल्हो एट अल., 2016)। 5-FU से उपचारित रोगियों में दस्त की घटना 50%-80% तक थी, जिसने कीमोथेरेपी की प्रगति और प्रभावकारिता को गंभीर रूप से प्रभावित किया (इयाकोवेली एट अल., 2014; रोसेनॉफ एट अल., 2006)। परिणामस्वरूप, 5-FU प्रेरित CID के लिए प्रभावी चिकित्सा खोजना अत्यंत महत्वपूर्ण है।

वर्तमान में, सीआईडी के नैदानिक उपचार में गैर-औषधि हस्तक्षेप और औषधि हस्तक्षेपों को शामिल किया गया है। गैर-औषधि हस्तक्षेपों में उचित आहार, नमक, चीनी और अन्य पोषक तत्वों की खुराक शामिल है। सीआईडी के दस्त-रोधी उपचार में लोपरामाइड और ऑक्ट्रियोटाइड जैसी दवाओं का आमतौर पर उपयोग किया जाता है (बेन्सन एट अल., 2004)। इसके अतिरिक्त, विभिन्न देशों में सीआईडी के उपचार के लिए अपनी अनूठी चिकित्सा पद्धतियों के साथ एथनोमेडिसिन को भी अपनाया जा रहा है। पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) एक विशिष्ट एथनोमेडिसिन है जिसका उपयोग चीन, जापान और कोरिया सहित पूर्वी एशियाई देशों में 2000 से भी अधिक वर्षों से किया जा रहा है (क्यूई एट अल., 2010)। टीसीएम का मानना है कि कीमोथेरेपी दवाएं क्यूई खपत, प्लीहा की कमी, पेट की गड़बड़ी और एंडोफाइटिक नमी को ट्रिगर कर सकती हैं, जिसके परिणामस्वरूप आंतों में संवाहक विकार हो सकते हैं। टीसीएम सिद्धांत में, सीआईडी की उपचार रणनीति मुख्य रूप से क्यूई की पूर्ति और प्लीहा को मजबूत करने पर निर्भर होनी चाहिए (वांग एट अल., 1994)।

की सूखी जड़ेंएट्रैक्टिलोड्स मैक्रोसेफालाकोएड्ज़. (एएम) औरपैनाक्स जिनसेंगसीए मे (पीजी) पारंपरिक चीनी चिकित्सा में विशिष्ट हर्बल औषधियाँ हैं जिनके क्यूई की पूर्ति और प्लीहा को मजबूत करने के समान प्रभाव हैं (ली एट अल., 2014)। एएम और पीजी का उपयोग आमतौर पर जड़ी-बूटियों के जोड़े (चीनी हर्बल अनुकूलता का सबसे सरल रूप) के रूप में किया जाता है, जिनके क्यूई की पूर्ति और प्लीहा को मजबूत करने के प्रभाव दस्त के इलाज के लिए होते हैं। उदाहरण के लिए, एएम और पीजी को शेन लिंग बाई झू सान, सी जुन ज़ी तांग जैसे शास्त्रीय दस्त-रोधी फ़ार्मुलों में प्रलेखित किया गया है।ताइपिंग हुइमिन हेजी जू फेंग(सोंग राजवंश, चीन) और बू झोंग यी क्यूई तांग सेपाई वेई लुन(युआन राजवंश, चीन) (चित्र 1)। पिछले कई अध्ययनों में बताया गया था कि तीनों फ़ॉर्मूले सीआईडी (बाई एट अल., 2017; चेन एट अल., 2019; गौ एट अल., 2016) को कम करने की क्षमता रखते हैं। इसके अलावा, हमारे पिछले अध्ययन से पता चला है कि शेनझू कैप्सूल, जिसमें केवल एएम और पीजी होते हैं, दस्त, कोलाइटिस (ज़ीक्सी सिंड्रोम) और अन्य जठरांत्र रोगों के उपचार पर संभावित प्रभाव डालते हैं (फेंग एट अल., 2018)। हालाँकि, किसी भी अध्ययन ने सीआईडी के इलाज में एएम और पीजी के प्रभाव और तंत्र पर चर्चा नहीं की है, चाहे संयोजन में या अकेले।

अब आंत माइक्रोबायोटा को टीसीएम (फेंग एट अल., 2019) के चिकित्सीय तंत्र को समझने में एक संभावित कारक माना जाता है। आधुनिक अध्ययन संकेत देते हैं कि आंत माइक्रोबायोटा आंतों के होमियोस्टेसिस को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। स्वस्थ आंत माइक्रोबायोटा आंतों के म्यूकोसल संरक्षण, चयापचय, प्रतिरक्षा होमियोस्टेसिस और प्रतिक्रिया, और रोगाणु दमन में योगदान देता है (थर्सबी और जुगे, 2017; पिकार्ड एट अल., 2017)। अव्यवस्थित आंत माइक्रोबायोटा मानव शरीर के शारीरिक और प्रतिरक्षा कार्यों को प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष रूप से बाधित करता है, जिससे दस्त जैसी दुष्प्रभाव उत्पन्न होते हैं (पटेल एट अल., 2016; झाओ और शेन, 2010)। शोधों से पता चला है कि 5-एफयू ने दस्तग्रस्त चूहों में आंत माइक्रोबायोटा की संरचना को उल्लेखनीय रूप से बदल दिया (ली एट अल., 2017 हालांकि, यह अभी भी अज्ञात है कि क्या अकेले एएम और पीजी या संयोजन में आंत माइक्रोबायोटा को संशोधित करके 5-एफयू प्रेरित दस्त को रोका जा सकता है।

दस्त-रोधी प्रभावों और एएम और पीजी के अंतर्निहित तंत्र की जाँच करने के लिए, हमने चूहों में दस्त संबंधी मॉडल का अनुकरण करने के लिए 5-एफयू का उपयोग किया। यहाँ, हमने एकल और संयुक्त प्रशासन (एपी) के संभावित प्रभावों पर ध्यान केंद्रित किया।एट्रैक्टिलोड्स मैक्रोसेफालाआवश्यक तेल (एएमओ) औरपैनाक्स जिनसेंग5-एफयू कीमोथेरेपी के बाद दस्त, आंत्र विकृति और माइक्रोबियल संरचना पर एएम और पीजी से निकाले गए क्रमशः सक्रिय घटक, कुल सैपोनिन (पीजीएस) का प्रभाव।

विवरण
त्वचा की देखभाल के लिए 100% शुद्ध प्राकृतिक यूकोमिया फोलियमल तेल आवश्यक तेल

यूकोमिया उल्मोइड्स(ईयू) (चीनी भाषा में आमतौर पर "डू झोंग" कहा जाता है) यूकोमियासी के परिवार से संबंधित है, जो मध्य चीन के मूल निवासी छोटे पेड़ की एक प्रजाति है [1]। अपने औषधीय महत्व के कारण, चीन में इस पौधे की व्यापक रूप से खेती की जाती है। ईयू से लगभग 112 यौगिक पृथक किए गए हैं जिनमें लिग्नान, इरिडोइड्स, फेनोलिक्स, स्टेरॉयड और अन्य यौगिक शामिल हैं। इस पौधे के पूरक जड़ी-बूटियों के फार्मूले (जैसे स्वादिष्ट चाय) में कुछ औषधीय गुण पाए गए हैं। ईयू की पत्तियों में कॉर्टेक्स, फूल और फल से संबंधित उच्च क्रियाशीलता होती है।2,3]। यूरोपीय संघ के पत्तों को हड्डियों की ताकत और शरीर की मांसपेशियों को बढ़ाने के लिए बताया गया है।4], जिससे मनुष्यों में दीर्घायु और प्रजनन क्षमता को बढ़ावा मिलता है [5]। ईयू की पत्तियों से बनी स्वादिष्ट चाय के फार्मूले से मोटापा कम करने और ऊर्जा चयापचय को बढ़ाने की सूचना मिली है। ईयू की पत्तियों में फ्लेवोनोइड यौगिक (जैसे रुटिन, क्लोरोजेनिक एसिड, फेरुलिक एसिड और कैफिक एसिड) एंटीऑक्सीडेंट गतिविधि प्रदर्शित करते पाए गए हैं।6].

यद्यपि ईयू के पादप-रासायनिक गुणों पर पर्याप्त साहित्य उपलब्ध है, फिर भी ईयू की छाल, बीज, तने और पत्तियों से निकाले गए विभिन्न यौगिकों के औषधीय गुणों पर बहुत कम अध्ययन हुए हैं। यह समीक्षा पत्र ईयू के विभिन्न भागों (छाल, बीज, तना और पत्ती) से निकाले गए विभिन्न यौगिकों और स्वास्थ्यवर्धक गुणों में इन यौगिकों के संभावित उपयोगों के बारे में विस्तृत जानकारी वैज्ञानिक प्रमाणों के साथ प्रस्तुत करेगा और इस प्रकार ईयू के अनुप्रयोग के लिए एक संदर्भ सामग्री प्रदान करेगा।

विवरण
शुद्ध प्राकृतिक हाउटुइनिया कॉर्डाटा तेल हाउटुइनिया कॉर्डाटा तेल लैक्टैमोलम तेल

अधिकांश विकासशील देशों में, 70-95% आबादी प्राथमिक स्वास्थ्य देखभाल के लिए पारंपरिक दवाओं पर निर्भर है और इनमें से 85% लोग सक्रिय पदार्थ के रूप में पौधों या उनके अर्क का उपयोग करते हैं।1पौधों से प्राप्त नए जैविक रूप से सक्रिय यौगिकों की खोज आमतौर पर स्थानीय चिकित्सकों से प्राप्त विशिष्ट जातीय और लोक जानकारी पर निर्भर करती है और इसे आज भी औषधि खोज का एक महत्वपूर्ण स्रोत माना जाता है। भारत में लगभग 2000 औषधियाँ पादप मूल की हैं।2औषधीय पौधों के उपयोग में व्यापक रुचि को देखते हुए, वर्तमान समीक्षाहाउटुइनिया कॉर्डेटाथुनब. साहित्य में दिखाई देने वाली वनस्पति, वाणिज्यिक, नृजातीय औषधीय, फाइटोकेमिकल और औषधीय अध्ययनों के संदर्भ में अद्यतन जानकारी प्रदान करता है।एच. कॉर्डेटाथुनब परिवार से संबंधित हैसॉरूरेसीऔर इसे आमतौर पर चीनी छिपकली की पूंछ के रूप में जाना जाता है। यह एक बारहमासी जड़ी बूटी है जिसमें स्टोलोनिफेरस प्रकंद होता है और इसके दो अलग-अलग केमोटाइप होते हैं।[3,4इस प्रजाति का चीनी केमोटाइप अप्रैल से सितंबर तक भारत के उत्तर-पूर्व में जंगली और अर्ध-जंगली परिस्थितियों में पाया जाता है।5,6,7]एच. कॉर्डेटायह भारत में, विशेष रूप से असम की ब्रह्मपुत्र घाटी में उपलब्ध है और असम की विभिन्न जनजातियों द्वारा सब्जी के रूप में तथा विभिन्न औषधीय प्रयोजनों में पारंपरिक रूप से इसका उपयोग किया जाता है।

विवरण
100% शुद्ध आर्कटियम लप्पा तेल निर्माता - गुणवत्ता आश्वासन प्रमाणपत्रों के साथ प्राकृतिक लाइम आर्कटियम लप्पा तेल

स्वास्थ्य सुविधाएं

बरडॉक की जड़ अक्सर खाई जाती है, फिर भी इसे सुखाकर चाय में भी डाला जा सकता है। यह इनुलिन के स्रोत के रूप में भी अच्छा काम करता है, जो एकप्रीबायोटिकफाइबर जो पाचन में सहायक होता है और आंत के स्वास्थ्य को बेहतर बनाता है। इसके अतिरिक्त, इस जड़ में फ्लेवोनोइड्स (पौधे के पोषक तत्व) भी होते हैं,फाइटोकेमिकल्स, और एंटीऑक्सिडेंट जो स्वास्थ्य लाभ के लिए जाने जाते हैं।

इसके अलावा, बर्डॉक जड़ अन्य लाभ भी प्रदान कर सकती है जैसे:

पुरानी सूजन को कम करें

बर्डॉक जड़ में कई एंटीऑक्सीडेंट होते हैं, जैसे कि क्वेरसेटिन, फेनोलिक एसिड और ल्यूटोलिन, जो आपकी कोशिकाओं को कैंसर से बचाने में मदद कर सकते हैं।मुक्त कणये एंटीऑक्सीडेंट पूरे शरीर में सूजन को कम करने में मदद करते हैं।

स्वास्थ्य जोखिम

बरडॉक की जड़ को खाने या चाय के रूप में पीने के लिए सुरक्षित माना जाता है। हालाँकि, यह पौधा बेलाडोना नाइटशेड पौधों से काफी मिलता-जुलता है, जो विषैला होता है। यह सलाह दी जाती है कि बरडॉक की जड़ केवल विश्वसनीय विक्रेताओं से ही खरीदें और इसे स्वयं इकट्ठा करने से बचें। इसके अतिरिक्त, बच्चों या गर्भवती महिलाओं पर इसके प्रभावों के बारे में बहुत कम जानकारी उपलब्ध है। बच्चों के साथ या यदि आप गर्भवती हैं, तो बरडॉक की जड़ का उपयोग करने से पहले अपने डॉक्टर से बात करें।

यदि आप बर्डॉक जड़ का उपयोग कर रहे हैं तो कुछ अन्य संभावित स्वास्थ्य जोखिमों पर विचार करें:

निर्जलीकरण में वृद्धि

बरडॉक की जड़ एक प्राकृतिक मूत्रवर्धक की तरह काम करती है, जिससे निर्जलीकरण हो सकता है। अगर आप पानी की गोलियाँ या अन्य मूत्रवर्धक लेते हैं, तो आपको बरडॉक की जड़ नहीं लेनी चाहिए। अगर आप ये दवाएँ लेते हैं, तो उन अन्य दवाओं, जड़ी-बूटियों और अवयवों के बारे में जानना ज़रूरी है जो निर्जलीकरण का कारण बन सकते हैं।

एलर्जी की प्रतिक्रिया

यदि आप डेज़ी, रैगवीड या गुलदाउदी के प्रति संवेदनशील हैं या आपको इनसे एलर्जी होने का इतिहास है, तो आपको बर्डॉक रूट से एलर्जी होने का खतरा बढ़ जाता है।

विवरण
थोक थोक मूल्य 100% शुद्ध AsariRadix Et Rhizoma तेल आराम अरोमाथेरेपी नीलगिरी ग्लोबुलस

जानवरों और इन विट्रो अध्ययनों ने सैसफ्रास और उसके घटकों के संभावित कवकरोधी, सूजनरोधी और हृदय संबंधी प्रभावों की जाँच की है। हालाँकि, नैदानिक परीक्षणों का अभाव है, और सैसफ्रास को उपयोग के लिए सुरक्षित नहीं माना जाता है। सैसफ्रास की जड़ की छाल और तेल के मुख्य घटक, सैफ्रोल, पर अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन (FDA) ने प्रतिबंध लगा दिया है, जिसमें स्वाद या सुगंध के रूप में उपयोग भी शामिल है, और इसका आंतरिक या बाह्य उपयोग नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि यह संभावित रूप से कैंसरकारी है। सैफ्रोल का उपयोग 3,4-मेथिलीन-डाइऑक्सीमेथैम्फेटामाइन (MDMA) के अवैध उत्पादन में किया गया है, जिसे "एक्स्टसी" या "मॉली" के नाम से भी जाना जाता है, और सैफ्रोल और सैसफ्रास तेल की बिक्री पर अमेरिकी औषधि प्रवर्तन प्रशासन द्वारा निगरानी रखी जाती है।

विवरण
थोक थोक मूल्य 100% शुद्ध स्टेलारिया रेडिक्स आवश्यक तेल (नया) रिलैक्स अरोमाथेरेपी नीलगिरी ग्लोबुलस

चीनी फार्माकोपिया (2020 संस्करण) के अनुसार YCH का मेथनॉल अर्क 20.0% से कम नहीं होना चाहिए [2], कोई अन्य गुणवत्ता मूल्यांकन संकेतक निर्दिष्ट नहीं किया गया है। इस अध्ययन के परिणाम दर्शाते हैं कि जंगली और संवर्धित दोनों नमूनों के मेथनॉल अर्क की सामग्री फार्माकोपिया मानक को पूरा करती है, और उनके बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। इसलिए, उस सूचकांक के अनुसार, जंगली और संवर्धित नमूनों के बीच कोई स्पष्ट गुणवत्ता अंतर नहीं था। हालांकि, जंगली नमूनों में कुल स्टेरोल और कुल फ्लेवोनोइड की सामग्री संवर्धित नमूनों की तुलना में काफी अधिक थी। आगे के मेटाबोलोमिक विश्लेषण से जंगली और संवर्धित नमूनों के बीच प्रचुर मात्रा में मेटाबोलाइट विविधता का पता चला। इसके अतिरिक्त, 97 काफी अलग मेटाबोलाइट्स की जांच की गई, जोपूरक तालिका S2। इन महत्वपूर्ण रूप से भिन्न मेटाबोलाइट्स में β-सिटोस्टेरॉल (आईडी M397T42 है) और क्वेरसेटिन डेरिवेटिव (M447T204_2) हैं, जिन्हें सक्रिय तत्व बताया गया है। पहले से अप्रतिबंधित घटक, जैसे ट्राइगोनेलिन (M138T291_2), बीटाइन (M118T277_2), फस्टिन (M269T36), रोटेनॉन (M241T189), आर्कटिन (M557T165) और लोगैनिक एसिड (M399T284_2) को भी विभेदक मेटाबोलाइट्स में शामिल किया गया था। ये घटक एंटीऑक्सीडेशन, एंटी-इंफ्लेमेटरी, फ्री रेडिकल्स को नष्ट करने, कैंसर विरोधी और एथेरोस्क्लेरोसिस के इलाज में विभिन्न भूमिकाएँ निभाते हैं और इसलिए, YCH में संभावित नए सक्रिय घटक का गठन कर सकते हैं। सक्रिय अवयवों की सामग्री औषधीय पदार्थों की प्रभावकारिता और गुणवत्ता निर्धारित करती है7]। संक्षेप में, एकमात्र YCH गुणवत्ता मूल्यांकन सूचकांक के रूप में मेथनॉल अर्क की कुछ सीमाएँ हैं, और अधिक विशिष्ट गुणवत्ता संकेतकों का और अधिक अन्वेषण किए जाने की आवश्यकता है। जंगली और संवर्धित YCH के बीच कुल स्टेरोल्स, कुल फ्लेवोनोइड्स और कई अन्य विभेदक मेटाबोलाइट्स की मात्रा में महत्वपूर्ण अंतर थे; इसलिए, उनके बीच गुणवत्ता में कुछ अंतर होने की संभावना थी। साथ ही, YCH में नए खोजे गए संभावित सक्रिय तत्व YCH के कार्यात्मक आधार के अध्ययन और YCH संसाधनों के आगे विकास के लिए एक महत्वपूर्ण संदर्भ मूल्य हो सकते हैं।

उत्कृष्ट गुणवत्ता वाली चीनी हर्बल दवाओं के उत्पादन के लिए मूल के विशिष्ट क्षेत्र में वास्तविक औषधीय सामग्रियों के महत्व को लंबे समय से मान्यता प्राप्त है।8]। उच्च गुणवत्ता वास्तविक औषधीय पदार्थों का एक अनिवार्य गुण है, और आवास ऐसी सामग्रियों की गुणवत्ता को प्रभावित करने वाला एक महत्वपूर्ण कारक है। जब से YCH का उपयोग औषधि के रूप में होने लगा है, तब से इस पर जंगली YCH का प्रभुत्व रहा है। 1980 के दशक में निंग्ज़िया में YCH के सफल परिचय और पालतूकरण के बाद, यिनचाईहु औषधीय पदार्थों का स्रोत धीरे-धीरे जंगली YCH से संवर्धित YCH में स्थानांतरित हो गया। YCH स्रोतों पर एक पूर्व जांच के अनुसार [9] और हमारे शोध समूह की क्षेत्रीय जांच से पता चलता है कि संवर्धित और जंगली औषधीय सामग्रियों के वितरण क्षेत्रों में महत्वपूर्ण अंतर हैं। जंगली YCH मुख्य रूप से शानक्सी प्रांत के निंग्ज़िया हुई स्वायत्त क्षेत्र में वितरित किया जाता है, जो भीतरी मंगोलिया और मध्य निंग्ज़िया के शुष्क क्षेत्र से सटा हुआ है। विशेष रूप से, इन क्षेत्रों में रेगिस्तानी मैदान YCH की वृद्धि के लिए सबसे उपयुक्त आवास है। इसके विपरीत, संवर्धित YCH मुख्य रूप से जंगली वितरण क्षेत्र के दक्षिण में वितरित किया जाता है, जैसे कि टोंगक्सिन काउंटी (संवर्धित I) और इसके आसपास के क्षेत्र, जो चीन में सबसे बड़ा खेती और उत्पादन का आधार बन गया है, और पेंगयांग काउंटी (संवर्धित II), जो अधिक दक्षिणी क्षेत्र में स्थित है और संवर्धित YCH का एक अन्य उत्पादक क्षेत्र है। इसके अलावा, उपरोक्त दोनों खेती वाले क्षेत्रों के आवास रेगिस्तानी मैदान नहीं हैं। विभिन्न आवास पौधों में द्वितीयक चयापचयों के निर्माण और संचय को प्रभावित करेंगे, जिससे औषधीय उत्पादों की गुणवत्ता प्रभावित होगी।10,11] इसलिए, कुल फ्लेवोनोइड्स और कुल स्टेरोल्स की सामग्री और 53 मेटाबोलाइट्स की अभिव्यक्ति में महत्वपूर्ण अंतर जो हमने इस अध्ययन में पाया, वह क्षेत्र प्रबंधन और आवास अंतर का परिणाम हो सकता है।

औषधीय पदार्थों की गुणवत्ता को प्रभावित करने वाले पर्यावरण के प्रमुख तरीकों में से एक स्रोत पौधों पर दबाव डालना है। मध्यम पर्यावरणीय तनाव द्वितीयक उपापचयजों के संचय को प्रोत्साहित करता है।12,13] वृद्धि/विभेदन संतुलन परिकल्पना कहती है कि, जब पोषक तत्व पर्याप्त मात्रा में होते हैं, तो पौधे मुख्य रूप से बढ़ते हैं, जबकि जब पोषक तत्वों की कमी होती है, तो पौधे मुख्य रूप से विभेदित होते हैं और अधिक द्वितीयक मेटाबोलाइट्स का उत्पादन करते हैं।14]। पानी की कमी से उत्पन्न सूखा तनाव शुष्क क्षेत्रों में पौधों के सामने आने वाला मुख्य पर्यावरणीय तनाव है। इस अध्ययन में, खेती की गई YCH की पानी की स्थिति अधिक प्रचुर है, जिसमें वार्षिक वर्षा का स्तर जंगली YCH की तुलना में काफी अधिक है (खेती I के लिए पानी की आपूर्ति जंगली की तुलना में लगभग 2 गुना थी; खेती II जंगली की तुलना में लगभग 3.5 गुना थी)। इसके अलावा, जंगली वातावरण में मिट्टी रेतीली मिट्टी है, लेकिन खेत की मिट्टी चिकनी मिट्टी है। मिट्टी की तुलना में, रेतीली मिट्टी में पानी धारण करने की क्षमता कम होती है और सूखे के तनाव को बढ़ाने की अधिक संभावना होती है। साथ ही, खेती की प्रक्रिया में अक्सर पानी देना शामिल था, इसलिए सूखे के तनाव की मात्रा कम थी। जंगली YCH कठोर प्राकृतिक शुष्क आवासों में बढ़ता है

परासरण नियमन एक महत्वपूर्ण शारीरिक तंत्र है जिसके द्वारा पौधे सूखे के तनाव का सामना करते हैं, और एल्कलॉइड उच्च पौधों में महत्वपूर्ण आसमाटिक नियामक हैं।15]। बीटाइन जल में घुलनशील एल्कलॉइड क्वाटरनरी अमोनियम यौगिक हैं और ऑस्मोप्रोटेक्टेंट्स के रूप में कार्य कर सकते हैं। सूखे का तनाव कोशिकाओं की आसमाटिक क्षमता को कम कर सकता है, जबकि ऑस्मोप्रोटेक्टेंट्स जैविक वृहद अणुओं की संरचना और अखंडता को संरक्षित और बनाए रखते हैं, और सूखे के तनाव से पौधों को होने वाले नुकसान को प्रभावी ढंग से कम करते हैं।16]। उदाहरण के लिए, सूखे के तनाव के तहत, चुकंदर और लाइसियम बारबरम में बीटाइन की मात्रा में उल्लेखनीय वृद्धि हुई [17,18]। ट्राइगोनेलिन कोशिका वृद्धि का नियामक है, और सूखे के दबाव में, यह पादप कोशिका चक्र की अवधि बढ़ा सकता है, कोशिका वृद्धि को बाधित कर सकता है और कोशिका आयतन में कमी ला सकता है। कोशिका में विलेय सांद्रता में सापेक्ष वृद्धि, पादप को परासरणी विनियमन प्राप्त करने और सूखे के दबाव का प्रतिरोध करने की उसकी क्षमता को बढ़ाने में सक्षम बनाती है।19]. जिया एक्स [20] ने पाया कि सूखे के तनाव में वृद्धि के साथ, एस्ट्रैगलस मेम्ब्रेनसियस (पारंपरिक चीनी चिकित्सा का एक स्रोत) ने अधिक ट्राइगोनेलिन का उत्पादन किया, जो आसमाटिक क्षमता को नियंत्रित करने और सूखे के तनाव का प्रतिरोध करने की क्षमता में सुधार करने का काम करता है। फ्लेवोनोइड्स भी सूखे के तनाव के प्रति पौधों की प्रतिरोधक क्षमता में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।21,22]। कई अध्ययनों ने इस बात की पुष्टि की है कि मध्यम सूखे का तनाव फ्लेवोनोइड्स के संचय के लिए अनुकूल था। लैंग डुओ-योंग एट अल। [23] ने खेत में जल धारण क्षमता को नियंत्रित करके YCH पर सूखे के प्रभाव की तुलना की। यह पाया गया कि सूखे के तनाव ने जड़ों की वृद्धि को कुछ हद तक बाधित किया, लेकिन मध्यम और गंभीर सूखे के तनाव (40% खेत की जल धारण क्षमता) में, YCH में कुल फ्लेवोनोइड की मात्रा बढ़ गई। इस बीच, सूखे के तनाव में, फाइटोस्टेरॉल कोशिका झिल्ली की तरलता और पारगम्यता को नियंत्रित करने, जल हानि को रोकने और तनाव प्रतिरोध में सुधार करने का काम कर सकते हैं।24,25] इसलिए, जंगली वाईसीएच में कुल फ्लेवोनोइड्स, कुल स्टेरोल्स, बीटाइन, ट्राइगोनेलिन और अन्य द्वितीयक मेटाबोलाइट्स का बढ़ता संचय उच्च तीव्रता वाले सूखे के तनाव से संबंधित हो सकता है।

इस अध्ययन में, जंगली और संवर्धित YCH के बीच महत्वपूर्ण रूप से भिन्न पाए गए मेटाबोलाइट्स पर KEGG मार्ग संवर्धन विश्लेषण किया गया। समृद्ध मेटाबोलाइट्स में एस्कॉर्बेट और एल्डारेट मेटाबोलिज़्म, एमिनोएसिल-टीआरएनए जैवसंश्लेषण, हिस्टिडीन मेटाबोलिज़्म और बीटा-एलानिन मेटाबोलिज़्म के मार्गों में शामिल मेटाबोलिज़्म शामिल थे। ये मेटाबोलिज़्म पथ पौधों के तनाव प्रतिरोध तंत्र से निकटता से संबंधित हैं। इनमें से, एस्कॉर्बेट मेटाबोलिज़्म पौधों के एंटीऑक्सीडेंट उत्पादन, कार्बन और नाइट्रोजन मेटाबोलिज़्म, तनाव प्रतिरोध और अन्य शारीरिक कार्यों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है।26]; अमीनोएसाइल-टीआरएनए जैवसंश्लेषण प्रोटीन निर्माण के लिए एक महत्वपूर्ण मार्ग है [27,28], जो तनाव-प्रतिरोधी प्रोटीन के संश्लेषण में शामिल है। हिस्टिडीन और β-एलेनिन दोनों मार्ग पर्यावरणीय तनाव के प्रति पौधों की सहनशीलता को बढ़ा सकते हैं।29,30]। इससे यह भी पता चलता है कि जंगली और संवर्धित YCH के बीच मेटाबोलाइट्स में अंतर तनाव प्रतिरोध की प्रक्रियाओं से निकटता से संबंधित था।

औषधीय पौधों की वृद्धि और विकास के लिए मिट्टी भौतिक आधार है। मिट्टी में नाइट्रोजन (N), फॉस्फोरस (P) और पोटेशियम (K) पौधों की वृद्धि और विकास के लिए महत्वपूर्ण पोषक तत्व हैं। मृदा कार्बनिक पदार्थ में औषधीय पौधों के लिए आवश्यक N, P, K, Zn, Ca, Mg और अन्य वृहत् और सूक्ष्म तत्व भी होते हैं। पोषक तत्वों की अधिकता या कमी, या असंतुलित पोषक तत्व अनुपात, औषधीय पदार्थों की वृद्धि, विकास और गुणवत्ता को प्रभावित करेगा, और विभिन्न पौधों की पोषक तत्वों की आवश्यकताएँ अलग-अलग होती हैं।31,32,33]। उदाहरण के लिए, कम नाइट्रोजन दबाव ने आइसैटिस इंडिगोटिका में एल्कलॉइड के संश्लेषण को बढ़ावा दिया और टेट्रास्टिग्मा हेम्सलीयनम, क्रेटेगस पिनाटिफिडा बंगे और डाइकॉन्ड्रा रेपेन्स फ़ोर्स्ट जैसे पौधों में फ्लेवोनॉइड के संचय के लिए फायदेमंद रहा। इसके विपरीत, अत्यधिक नाइट्रोजन ने एरिगेरॉन ब्रेविस्कैपस, एब्रस कैंटोनीएंसिस और जिन्कगो बिलोबा जैसी प्रजातियों में फ्लेवोनॉइड के संचय को बाधित किया और औषधीय पदार्थों की गुणवत्ता को प्रभावित किया।34]। पी उर्वरक का प्रयोग यूराल मुलेठी में ग्लाइसीराइज़िक एसिड और डायहाइड्रोएसीटोन की मात्रा बढ़ाने में प्रभावी था।35]। जब आवेदन की मात्रा 0·12 kg·m−2 से अधिक हो गई, तो टुसिलागो फ़ार्फ़ारा में कुल फ़्लेवोनोइड सामग्री कम हो गई [36]। पी उर्वरक के प्रयोग से पारंपरिक चीनी औषधि राइज़ोमा पॉलीगोनाटी में पॉलीसैकराइड की मात्रा पर नकारात्मक प्रभाव पड़ा।37], लेकिन K उर्वरक सैपोनिन की मात्रा बढ़ाने में प्रभावी था [38]। दो साल के पैनेक्स नोटोगिन्सेंग के विकास और सैपोनिन संचय के लिए 450 kg·hm−2K उर्वरक का प्रयोग सबसे अच्छा था।39]। N:P:K = 2:2:1 के अनुपात के तहत, हाइड्रोथर्मल अर्क, हार्पागाइड और हार्पागोसाइड की कुल मात्रा सबसे अधिक थी [40]। N, P और K का उच्च अनुपात पोगोस्टेमन कैबलिन की वृद्धि को बढ़ावा देने और वाष्पशील तेल की मात्रा बढ़ाने में सहायक था। N, P और K के कम अनुपात ने पोगोस्टेमन कैबलिन के तने के पत्ते के तेल के मुख्य प्रभावी घटकों की मात्रा बढ़ा दी।41]। YCH एक बंजर मिट्टी-सहिष्णु पौधा है, और इसे N, P और K जैसे पोषक तत्वों की विशिष्ट आवश्यकताएँ हो सकती हैं। इस अध्ययन में, संवर्धित YCH की तुलना में, जंगली YCH पौधों की मिट्टी अपेक्षाकृत बंजर थी: कार्बनिक पदार्थ, कुल N, कुल P और कुल K की मिट्टी की मात्रा संवर्धित पौधों की तुलना में क्रमशः लगभग 1/10, 1/2, 1/3 और 1/3 थी। इसलिए, मृदा पोषक तत्वों में अंतर संवर्धित और जंगली YCH में पाए गए मेटाबोलाइट्स के बीच अंतर का एक अन्य कारण हो सकता है। वेइबाओ मा एट अल. [42] ने पाया कि नाइट्रोजन और फास्फोरस उर्वरक की एक निश्चित मात्रा के प्रयोग से बीजों की उपज और गुणवत्ता में उल्लेखनीय सुधार हुआ। हालाँकि, YCH की गुणवत्ता पर पोषक तत्वों का प्रभाव स्पष्ट नहीं है, और औषधीय पदार्थों की गुणवत्ता में सुधार के लिए उर्वरक उपायों पर और अध्ययन की आवश्यकता है।

चीनी हर्बल दवाओं की विशेषता है कि “अनुकूल आवास उपज को बढ़ावा देते हैं, और प्रतिकूल आवास गुणवत्ता में सुधार करते हैं” [43]। जंगली से संवर्धित YCH की ओर क्रमिक बदलाव की प्रक्रिया में, पौधों का आवास शुष्क और बंजर रेगिस्तानी मैदानों से बदलकर अधिक प्रचुर जल वाले उपजाऊ कृषि भूमि में बदल गया। संवर्धित YCH का आवास बेहतर है और उपज भी अधिक है, जो बाजार की मांग को पूरा करने में सहायक है। हालाँकि, इस बेहतर आवास के कारण YCH के मेटाबोलाइट्स में महत्वपूर्ण परिवर्तन हुए हैं; क्या यह YCH की गुणवत्ता में सुधार के लिए अनुकूल है और विज्ञान-आधारित खेती के उपायों के माध्यम से YCH का उच्च-गुणवत्ता वाला उत्पादन कैसे प्राप्त किया जाए, इस पर आगे और शोध की आवश्यकता होगी।

अनुकरणीय आवास खेती जंगली औषधीय पौधों के आवास और पर्यावरणीय स्थितियों का अनुकरण करने की एक विधि है, जो विशिष्ट पर्यावरणीय तनावों के लिए पौधों के दीर्घकालिक अनुकूलन के ज्ञान पर आधारित है।43] जंगली पौधों, विशेष रूप से प्रामाणिक औषधीय सामग्रियों के स्रोत के रूप में उपयोग किए जाने वाले पौधों के मूल निवास स्थान को प्रभावित करने वाले विभिन्न पर्यावरणीय कारकों का अनुकरण करके, यह दृष्टिकोण चीनी औषधीय पौधों की वृद्धि और द्वितीयक चयापचय को संतुलित करने के लिए वैज्ञानिक डिजाइन और अभिनव मानव हस्तक्षेप का उपयोग करता है।43]। इन विधियों का उद्देश्य उच्च गुणवत्ता वाली औषधीय सामग्री के विकास के लिए इष्टतम व्यवस्था प्राप्त करना है। सिमुलेटिव आवास खेती को YCH के उच्च गुणवत्ता वाले उत्पादन के लिए एक प्रभावी तरीका प्रदान करना चाहिए, भले ही फार्माकोडायनामिक आधार, गुणवत्ता मार्कर और पर्यावरणीय कारकों के प्रति प्रतिक्रिया तंत्र अस्पष्ट हों। तदनुसार, हम सुझाव देते हैं कि YCH की खेती और उत्पादन में वैज्ञानिक डिजाइन और क्षेत्र प्रबंधन उपायों को जंगली YCH की पर्यावरणीय विशेषताओं, जैसे शुष्क, बंजर और रेतीली मिट्टी की स्थिति के संदर्भ में किया जाना चाहिए। साथ ही, यह भी आशा की जाती है कि शोधकर्ता YCH के कार्यात्मक सामग्री आधार और गुणवत्ता मार्करों पर अधिक गहन शोध करेंगे। ये अध्ययन YCH के लिए अधिक प्रभावी मूल्यांकन मानदंड प्रदान कर सकते हैं, और उद्योग के उच्च गुणवत्ता वाले उत्पादन और सतत विकास को बढ़ावा दे सकते हैं।

विवरण
हर्बल फ्रुक्टस अमोमी तेल प्राकृतिक मालिश डिफ्यूज़र 1 किलो थोक अमोमम विलोसम आवश्यक तेल

ज़िंगिबरेसी परिवार ने अपनी सदस्य प्रजातियों की समृद्ध वाष्पशील तेलों और सुगंधित गुणों के कारण ऐलीलोपैथिक अनुसंधान में बढ़ती रुचि आकर्षित की है। पिछले शोधों से पता चला है कि करकुमा ज़ेडोरिया (ज़ेडोरी) के रसायन [40], अल्पिनिया ज़ेरुम्बेट (पर्स.) बी.एल.बर्ट और आर.एम.एस.एम. [41] और ज़िंगिबर ऑफ़िसिनेल रोस्क. [42] का मक्का, सलाद पत्ता और टमाटर के बीज अंकुरण और पौध वृद्धि पर ऐलीलोपैथिक प्रभाव पड़ता है। हमारा वर्तमान अध्ययन ए. विलोसम (ज़िंगिबरेसी परिवार का एक सदस्य) के तनों, पत्तियों और युवा फलों से प्राप्त वाष्पशील पदार्थों की ऐलीलोपैथिक गतिविधि पर पहली रिपोर्ट है। तनों, पत्तियों और युवा फलों की तेल उपज क्रमशः 0.15%, 0.40% और 0.50% थी, जो दर्शाता है कि फलों ने तनों और पत्तियों की तुलना में बड़ी मात्रा में वाष्पशील तेलों का उत्पादन किया। तनों से प्राप्त वाष्पशील तेलों के मुख्य घटक β-पाइनीन, β-फेलैंड्रीन और α-पाइनीन थे, जो पत्ती के तेल के प्रमुख रसायनों, β-पाइनीन और α-पाइनीन (मोनोटेरपीन हाइड्रोकार्बन) के समान पैटर्न था। दूसरी ओर, युवा फलों में तेल बोर्निल एसीटेट और कपूर (ऑक्सीजन युक्त मोनोटेरपीन) से समृद्ध था। परिणामों को डो एन दाई के निष्कर्षों द्वारा समर्थित किया गया था30,32] और हुई एओ [31] जिन्होंने ए. विलोसम के विभिन्न अंगों से तेलों की पहचान की थी।

अन्य प्रजातियों में इन मुख्य यौगिकों की पादप वृद्धि अवरोधक गतिविधियों पर कई रिपोर्टें प्रकाशित हुई हैं। शालिंदर कौर ने पाया कि यूकेलिप्टस से प्राप्त α-पाइनिन ने 1.0 μL सांद्रता पर ऐमारैंथस विरिडिस एल. की जड़ की लंबाई और टहनियों की ऊँचाई को प्रमुखता से दबा दिया।43], और एक अन्य अध्ययन से पता चला कि α-पिनीन ने शुरुआती जड़ विकास को बाधित किया और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों की बढ़ी हुई पीढ़ी के माध्यम से जड़ ऊतक में ऑक्सीडेटिव क्षति का कारण बना [44]। कुछ रिपोर्टों में तर्क दिया गया है कि β-पाइनिन ने झिल्ली की अखंडता को बाधित करके खुराक पर निर्भर प्रतिक्रिया तरीके से परीक्षण खरपतवारों के अंकुरण और अंकुर विकास को बाधित किया।45], पौधों की जैव रसायन शास्त्र में परिवर्तन करना और पेरोक्सिडेस और पॉलीफेनोल ऑक्सीडेस की गतिविधियों को बढ़ाना [46] β-फेलैंड्रीन ने 600 पीपीएम की सांद्रता पर विग्ना यूंगुइकुलाटा (एल.) वाल्प के अंकुरण और विकास में अधिकतम अवरोध प्रदर्शित किया।47], जबकि, 250 मिलीग्राम/एम3 की सांद्रता पर, कपूर ने लेपिडियम सैटिवम एल के मूलांकुर और प्ररोह वृद्धि को दबा दिया। [48]। हालांकि, बोर्निल एसीटेट के ऐलीलोपैथिक प्रभाव की रिपोर्ट करने वाले शोध कम हैं। हमारे अध्ययन में, β-पाइनीन, बोर्निल एसीटेट और कपूर का जड़ की लंबाई पर ऐलीलोपैथिक प्रभाव α-पाइनीन को छोड़कर वाष्पशील तेलों की तुलना में कमजोर था, जबकि α-पाइनीन से समृद्ध पत्ती का तेल, ए. विलोसम के तनों और फलों से प्राप्त संबंधित वाष्पशील तेलों की तुलना में अधिक फाइटोटॉक्सिक था, दोनों निष्कर्ष यह संकेत देते हैं कि α-पाइनीन इस प्रजाति द्वारा ऐलीलोपैथिक प्रभाव के लिए महत्वपूर्ण रसायन हो सकता है। साथ ही, परिणामों से यह भी संकेत मिलता है कि फल के तेल में कुछ यौगिक जो प्रचुर मात्रा में नहीं थे, फाइटोटॉक्सिक प्रभाव के उत्पादन में योगदान कर सकते हैं, एक ऐसा निष्कर्ष जिस पर भविष्य में और शोध की आवश्यकता है।

सामान्य परिस्थितियों में, ऐलीलोकेमिकल्स का ऐलीलोपैथिक प्रभाव प्रजाति-विशिष्ट होता है। जियांग एट अल. ने पाया कि आर्टेमिसिया सिवेर्सियाना द्वारा उत्पादित आवश्यक तेल, मेडिकागो सैटिवा एल., पोआ एनुआ एल., और पेनिसेटम एलोपेकुरोइड्स (एल.) स्प्रेंग की तुलना में ऐमारैंथस रेट्रोफ्लेक्सस एल. पर अधिक प्रभावशाली प्रभाव डालता है।49]। एक अन्य अध्ययन में, लैवेंडुला एंगुस्टिफोलिया मिल के वाष्पशील तेल ने विभिन्न पादप प्रजातियों पर अलग-अलग मात्रा में फाइटोटॉक्सिक प्रभाव उत्पन्न किए। लोलियम मल्टीफ्लोरम लैम सबसे संवेदनशील ग्राही प्रजाति थी, जिसमें 1 μL/mL तेल की खुराक पर हाइपोकोटाइल और मूलांकुर वृद्धि क्रमशः 87.8% और 76.7% तक बाधित हुई, लेकिन खीरे के पौधों की हाइपोकोटाइल वृद्धि पर बहुत कम प्रभाव पड़ा।20] हमारे परिणामों से यह भी पता चला कि एल. सैटिवा और एल. पेरेन के बीच ए. विलोसम वाष्पशील पदार्थों के प्रति संवेदनशीलता में अंतर था।

एक ही प्रजाति के वाष्पशील यौगिक और आवश्यक तेल, वृद्धि की स्थितियों, पौधों के भागों और पहचान विधियों के कारण मात्रात्मक और/या गुणात्मक रूप से भिन्न हो सकते हैं। उदाहरण के लिए, एक रिपोर्ट से पता चला है कि सैम्बुकस नाइग्रा की पत्तियों से निकलने वाले वाष्पशील यौगिकों में पाइरानॉइड (10.3%) और β-कैरियोफिलीन (6.6%) प्रमुख यौगिक थे, जबकि पत्तियों से निकाले गए तेलों में बेंजाल्डिहाइड (17.8%), α-बुल्नेसीन (16.6%) और टेट्राकोसेन (11.5%) प्रचुर मात्रा में पाए गए।50]। हमारे अध्ययन में, ताज़ी पादप सामग्री द्वारा उत्सर्जित वाष्पशील यौगिकों का परीक्षण पौधों पर निकाले गए वाष्पशील तेलों की तुलना में अधिक ऐलीलोपैथिक प्रभाव था, और प्रतिक्रिया में अंतर दोनों तैयारियों में मौजूद ऐलीलोकेमिकल्स के अंतर से निकटता से संबंधित था। वाष्पशील यौगिकों और तेलों के बीच सटीक अंतरों की आगे के प्रयोगों में और जाँच की जानी आवश्यक है।

जिन मृदा नमूनों में वाष्पशील तेल मिलाए गए थे, उनमें सूक्ष्मजीव विविधता और सूक्ष्मजीव समुदाय संरचना में अंतर सूक्ष्मजीवों के बीच प्रतिस्पर्धा के साथ-साथ किसी भी विषाक्त प्रभाव और मृदा में वाष्पशील तेलों की अवधि से संबंधित थे। वोकोउ और लिओटिरी [51] ने पाया कि खेती की गई मिट्टी (150 ग्राम) में चार आवश्यक तेलों (0.1 एमएल) के क्रमशः प्रयोग ने मिट्टी के नमूनों के श्वसन को सक्रिय कर दिया, यहां तक कि तेलों की रासायनिक संरचना भी अलग-अलग थी, जो यह दर्शाता है कि पौधे के तेलों का उपयोग मिट्टी के सूक्ष्मजीवों द्वारा कार्बन और ऊर्जा स्रोत के रूप में किया जाता है। वर्तमान अध्ययन से प्राप्त आंकड़ों ने पुष्टि की है कि ए. विलोसम के पूरे पौधे से प्राप्त तेलों ने तेल मिलाने के 14वें दिन तक मिट्टी के कवक प्रजातियों की संख्या में स्पष्ट वृद्धि में योगदान दिया, जो दर्शाता है कि तेल अधिक मिट्टी के कवकों के लिए कार्बन स्रोत प्रदान कर सकता है। एक अन्य अध्ययन में एक खोज की सूचना दी गई: थाइम्ब्रा कैपिटाटा एल. (कैव) तेल मिलाने से प्रेरित बदलाव की एक अस्थायी अवधि के बाद मिट्टी के सूक्ष्मजीवों ने अपने प्रारंभिक कार्य और बायोमास को पुनः प्राप्त कर लिया,52]। वर्तमान अध्ययन में, विभिन्न दिनों और सांद्रता के साथ इलाज किए जाने के बाद मिट्टी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण के आधार पर, हमने अनुमान लगाया कि मिट्टी के जीवाणु समुदाय अधिक दिनों के बाद ठीक हो जाएंगे। इसके विपरीत, फंगल माइक्रोबायोटा अपनी मूल स्थिति में वापस नहीं आ सकता है। निम्नलिखित परिणाम इस परिकल्पना की पुष्टि करते हैं: मिट्टी के फंगल माइक्रोबायोम की संरचना पर तेल की उच्च सांद्रता का स्पष्ट प्रभाव प्रमुख निर्देशांक विश्लेषण (पीसीओए) द्वारा पता चला था, और हीटमैप प्रस्तुतियों ने फिर से पुष्टि की कि जीनस स्तर पर 3.0 मिलीग्राम / एमएल तेल (अर्थात मिट्टी के प्रति ग्राम 0.375 मिलीग्राम तेल) के साथ इलाज की गई मिट्टी की फंगल समुदाय संरचना अन्य उपचारों से काफी भिन्न थी। वर्तमान में, मिट्टी के माइक्रोबियल विविधता और समुदाय संरचना पर मोनोटेरपीन हाइड्रोकार्बन या ऑक्सीजनयुक्त मोनोटेरपीन के प्रभाव के बारे में शोध अभी भी दुर्लभ है। कुछ अध्ययनों में बताया गया है कि α-पिनीन ने कम नमी की मात्रा के तहत मिट्टी की माइक्रोबियल गतिविधि और मिथाइलोफिलेसी (मिथाइलोट्रोफ्स, प्रोटियोबैक्टीरिया का एक समूह) की सापेक्ष बहुतायत को बढ़ाया, जो शुष्क मिट्टी में कार्बन स्रोत के रूप में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है [53] इसी प्रकार, ए. विलोसम पूरे पौधे का वाष्पशील तेल, जिसमें 15.03% α-पाइनिन (पूरक तालिका S1), ने स्पष्ट रूप से 1.5 मिलीग्राम/एमएल और 3.0 मिलीग्राम/एमएल पर प्रोटियोबैक्टीरिया की सापेक्ष प्रचुरता को बढ़ा दिया, जिससे पता चला कि α-पिनीन संभवतः मिट्टी के सूक्ष्मजीवों के लिए कार्बन स्रोतों में से एक के रूप में कार्य करता है।

ए. विलोसम के विभिन्न अंगों द्वारा उत्पादित वाष्पशील यौगिकों का एल. सातिवा और एल. पेरेन पर विभिन्न स्तरों पर ऐलीलोपैथिक प्रभाव पड़ा, जो ए. विलोसम के पौधे के भागों में मौजूद रासायनिक घटकों से निकटता से संबंधित था। यद्यपि वाष्पशील तेल की रासायनिक संरचना की पुष्टि हो चुकी है, लेकिन कमरे के तापमान पर ए. विलोसम द्वारा उत्सर्जित वाष्पशील यौगिक अज्ञात हैं, जिनकी आगे जांच की आवश्यकता है। इसके अलावा, विभिन्न ऐलीलोकेमिकल्स के बीच सहक्रियात्मक प्रभाव भी विचारणीय है। मृदा सूक्ष्मजीवों के संदर्भ में, मृदा सूक्ष्मजीवों पर वाष्पशील तेल के प्रभाव का व्यापक रूप से पता लगाने के लिए, हमें अभी और गहन शोध करने की आवश्यकता है: वाष्पशील तेल के उपचार समय को बढ़ाना और विभिन्न दिनों में मिट्टी में वाष्पशील तेल की रासायनिक संरचना में भिन्नताओं को समझना।

विवरण
मोमबत्ती और साबुन बनाने के लिए शुद्ध आर्टेमिसिया कैपिलारिस तेल थोक विसारक आवश्यक तेल रीड बर्नर डिफ्यूज़र के लिए नया

कृंतक मॉडल डिजाइन

जानवरों को यादृच्छिक रूप से पंद्रह-पंद्रह चूहों के पाँच समूहों में विभाजित किया गया। नियंत्रण समूह और मॉडल समूह के चूहों कोतिल का तेल6 दिनों के लिए। सकारात्मक नियंत्रण समूह के चूहों को 6 दिनों तक बाइफेंडेट टैबलेट (बीटी, 10 मिलीग्राम/किग्रा) दी गईं। प्रायोगिक समूहों को 6 दिनों तक तिल के तेल में 100 मिलीग्राम/किग्रा और 50 मिलीग्राम/किग्रा एईओ घोलकर उपचारित किया गया। छठे दिन, नियंत्रण समूह को तिल के तेल से उपचारित किया गया, और अन्य सभी समूहों को तिल के तेल में 0.2% सीसीएल4 की एक खुराक (10 मिलीग्राम/किग्रा) से उपचारित किया गया।इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शनइसके बाद चूहों को पानी से मुक्त कर उपवास कराया गया और रेट्रोबुलबार वाहिकाओं से रक्त के नमूने एकत्र किए गए; एकत्र रक्त को 3000 × पर सेंट्रीफ्यूज किया गया।gसीरम को अलग करने के लिए 10 मिनट तक प्रतीक्षा करें।ग्रीवा अव्यवस्थारक्त निकालने के तुरंत बाद एक परीक्षण किया गया और लिवर के नमूने तुरंत निकाल लिए गए। लिवर के नमूने के एक हिस्से को विश्लेषण तक तुरंत -20°C पर संग्रहीत किया गया, और दूसरे हिस्से को निकालकर 10%फॉर्मेलिनसमाधान; शेष ऊतकों को हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण के लिए -80 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया (वांग एट अल., 2008,ह्सू एट अल., 2009,नी एट अल., 2015).

सीरम में जैव रासायनिक मापदंडों का मापन

यकृत की चोट का आकलन निम्नांकित अनुमानों के आधार पर किया गया:एंजाइमी गतिविधियाँकिट के निर्देशों के अनुसार संबंधित व्यावसायिक किट का उपयोग करके सीरम एएलटी और एएसटी का विश्लेषण किया गया (नानजिंग, जिआंगसू प्रांत, चीन)। एंजाइमी गतिविधियों को प्रति लीटर इकाइयों (यू/एल) के रूप में व्यक्त किया गया था।

एमडीए, एसओडी, जीएसएच और जीएसएच-पी का मापनxयकृत होमोजीनेट्स में

यकृत के ऊतकों को ठंडे फिजियोलॉजिकल सलाइन के साथ 1:9 के अनुपात (w/v, यकृत:सलाइन) में होमोजेनाइज़ किया गया। होमोजेनेट्स को सेंट्रीफ्यूज किया गया (2500 ×gबाद के निर्धारणों के लिए सुपरनैटेंट्स एकत्र करने हेतु (10 मिनट के लिए) लिवर क्षति का आकलन MDA और GSH स्तरों के साथ-साथ SOD और GSH-P के यकृत माप के अनुसार किया गया।xगतिविधियाँ। इन सभी का निर्धारण किट पर दिए गए निर्देशों के अनुसार किया गया (नानजिंग, जिआंगसू प्रांत, चीन)। एमडीए और जीएसएच के परिणाम एनएमओएल प्रति मिलीग्राम प्रोटीन (एनएमओएल/एमजी प्रोट) के रूप में व्यक्त किए गए, और एसओडी और जीएसएच-पी की गतिविधियाँxयू प्रति मिलीग्राम प्रोटीन (यू/एमजी प्रोट) के रूप में व्यक्त किया गया।

हिस्टोपैथोलॉजिकल विश्लेषण

ताजा प्राप्त यकृत के अंशों को 10% बफर में स्थिर किया गयाparaformaldehydeफॉस्फेट घोल। फिर नमूने को पैराफिन में डुबोया गया, 3-5 माइक्रोन के टुकड़ों में काटा गया, और रंगा गयाhematoxylinऔरइओसिन(एच एंड ई) एक मानक प्रक्रिया के अनुसार, और अंत में विश्लेषण किया गयाहल्की माइक्रोस्कोपी(तियान एट अल., 2012).

सांख्यिकीय विश्लेषण

परिणाम माध्य ± मानक विचलन (SD) के रूप में व्यक्त किए गए थे। परिणामों का विश्लेषण सांख्यिकीय कार्यक्रम SPSS सांख्यिकी, संस्करण 19.0 का उपयोग करके किया गया। आँकड़ों का विचरण विश्लेषण (ANOVA,p< 0.05) के बाद विभिन्न प्रायोगिक समूहों के मानों के बीच सांख्यिकीय रूप से सार्थक अंतर निर्धारित करने के लिए डननेट परीक्षण और डननेट T3 परीक्षण का उपयोग किया गया। सार्थक अंतर को निम्न स्तर पर माना गया।p< 0.05.

परिणाम और चर्चा

AEO के घटक

जीसी/एमएस विश्लेषण के बाद, एईओ में 10 से 35 मिनट तक 25 घटक पाए गए, और 84% आवश्यक तेल के लिए जिम्मेदार 21 घटकों की पहचान की गई (तालिका नंबर एक) इसमें मौजूद वाष्पशील तेलमोनोटेरपेनोइड्स(80.9%), सेस्क्यूटरपेनॉइड्स (9.5%), संतृप्त अशाखित हाइड्रोकार्बन (4.86%) और विविध एसिटिलीन (4.86%)। अन्य अध्ययनों की तुलना में (गुओ एट अल., 2004), हमें AEO में प्रचुर मात्रा में मोनोटेरपेनॉइड (80.90%) मिले। परिणामों से पता चला कि AEO का सबसे प्रचुर घटक β-सिट्रोनेलोल (16.23%) है। AEO के अन्य प्रमुख घटकों में 1,8-सिनेओल (13.9%) शामिल हैं।कपूर(12.59%),लिनालूल(11.33%), α-पिनीन (7.21%), β-पिनीन (3.99%),अजवाइन का सत्व(3.22%), औरमायर्सीन(2.02%)। रासायनिक संरचना में भिन्नता उन पर्यावरणीय परिस्थितियों से संबंधित हो सकती है जिनके संपर्क में पौधा आया था, जैसे खनिज जल, सूर्य का प्रकाश, विकास का चरण औरपोषण.

विवरण
मोमबत्ती और साबुन बनाने के लिए शुद्ध Saposhnikovia divaricata तेल थोक विसारक आवश्यक तेल रीड बर्नर डिफ्यूज़र के लिए नया

2.1. एसडीई की तैयारी

एसडी के प्रकंदों को हनहर्ब कंपनी (गुरी, कोरिया) से सूखी जड़ी-बूटी के रूप में खरीदा गया था। कोरिया इंस्टीट्यूट ऑफ ओरिएंटल मेडिसिन (केआईओएम) के डॉ. गो-या चोई द्वारा पादप सामग्री की वर्गीकरणीय पुष्टि की गई थी। एक वाउचर नमूना (संख्या 2014 एसडीई-6) को स्टैंडर्ड हर्बल रिसोर्सेज के कोरियाई हर्बेरियम में जमा किया गया था। एसडी के सूखे प्रकंदों (320 ग्राम) को 70% इथेनॉल (2 घंटे के रिफ्लक्स के साथ) के साथ दो बार निकाला गया और फिर अर्क को कम दबाव में सांद्रित किया गया। काढ़े को छानकर, द्रव-रासायनिक किया गया और 4°C पर संग्रहित किया गया। अपरिष्कृत प्रारंभिक सामग्रियों से सूखे अर्क की उपज 48.13% (w/w) थी।

2.2. मात्रात्मक उच्च-प्रदर्शन द्रव क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) विश्लेषण

क्रोमैटोग्राफिक विश्लेषण एक HPLC प्रणाली (वाटर्स कंपनी, मिलफोर्ड, मैसाचुसेट्स, यूएसए) और एक फोटोडायोड ऐरे डिटेक्टर के साथ किया गया। SDE के HPLC विश्लेषण के लिए, प्राथमिक-O-ग्लूकोसिलसिमिफुगिन मानक कोरिया प्रमोशन इंस्टीट्यूट फॉर ट्रेडिशनल मेडिसिन इंडस्ट्री (ग्योंगसन, कोरिया) से खरीदा गया था, औरसेकंड-O-ग्लूकोसिलहामॉडोल और 4′-O-β-डी-ग्लूकोसिल-5-O-मेथिलविसामिनोलोल को हमारी प्रयोगशाला में पृथक किया गया और वर्णक्रमीय विश्लेषण, मुख्यतः एनएमआर और एमएस द्वारा पहचाना गया।

एसडीई नमूने (0.1 मिलीग्राम) 70% इथेनॉल (10 मिलीलीटर) में घोले गए। क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण एक एक्ससिलेक्ट एचएसएस टी3 सी18 कॉलम (4.6 × 250 मिमी, 5) के साथ किया गया।μमीटर, वाटर्स कंपनी, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए)। मोबाइल चरण में 1.0 एमएल/मिनट की प्रवाह दर पर एसीटोनिट्राइल (ए) और पानी (बी) में 0.1% एसिटिक एसिड शामिल था। एक मल्टीस्टेप ग्रेडिएंट प्रोग्राम का उपयोग इस प्रकार किया गया था: 5% ए (0 मिनट), 5-20% ए (0-10 मिनट), 20% ए (10-23 मिनट), और 20-65% ए (23-40 मिनट)। पता लगाने की तरंग दैर्ध्य को 210-400 एनएम पर स्कैन किया गया और 254 एनएम पर दर्ज किया गया। इंजेक्शन की मात्रा 10.0 थीμएल. तीन क्रोमोनों के निर्धारण के लिए मानक समाधान 7.781 मिलीग्राम/एमएल (प्राइम-) की अंतिम सांद्रता पर तैयार किए गए थे।O-ग्लूकोसिलसिमिफुगिन), 31.125 मिलीग्राम/एमएल (4′-O-β-डी-ग्लूकोसिल-5-O-मेथिलविसामिनोल), और 31.125 मिलीग्राम/एमएल (सेकंड-O-ग्लूकोसिलहामाडोल) को मेथनॉल में मिलाया गया और 4°C पर रखा गया।

2.3. सूजन-रोधी गतिविधि का मूल्यांकनकृत्रिम परिवेशीय

2.3.1. कोशिका संवर्धन और नमूना उपचार

अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन (ATCC, मानसास, वर्जीनिया, अमेरिका) से RAW 264.7 कोशिकाएँ प्राप्त की गईं और उन्हें 1% एंटीबायोटिक्स और 5.5% FBS युक्त DMEM माध्यम में उगाया गया। कोशिकाओं को 37°C पर 5% CO2 के आर्द्र वातावरण में इनक्यूबेट किया गया। कोशिकाओं को उत्तेजित करने के लिए, माध्यम को ताज़ा DMEM माध्यम और लिपोपॉलीसेकेराइड (LPS, सिग्मा-एल्ड्रिच केमिकल कंपनी, सेंट लुइस, मिसौरी, अमेरिका) से 1% पर प्रतिस्थापित किया गया।μएसडीई (200 या 400) की उपस्थिति या अनुपस्थिति में ग्राम/एमएल मिलाया गयाμग्राम/एमएल) को अतिरिक्त 24 घंटे के लिए रखा जाना चाहिए।

2.3.2. नाइट्रिक ऑक्साइड (NO), प्रोस्टाग्लैंडीन E2 (PGE2), ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर का निर्धारण-α(टीएनएफ-α), और इंटरल्यूकिन-6 (IL-6) उत्पादन

कोशिकाओं को एसडीई से उपचारित किया गया और 24 घंटे के लिए एलपीएस से उत्तेजित किया गया। पिछले अध्ययन के अनुसार, ग्रीस अभिकर्मक का उपयोग करके नाइट्राइट को मापकर नाइट्रोजन ऑक्साइड (NO) उत्पादन का विश्लेषण किया गया [12] सूजन पैदा करने वाले साइटोकिन्स PGE2, TNF- का स्रावα, और निर्माता के निर्देशों के अनुसार IL-6 का निर्धारण ELISA किट (R&D सिस्टम) का उपयोग करके किया गया। NO और साइटोकाइन उत्पादन पर SDE के प्रभावों को Wallac EnVision का उपयोग करके 540 nm या 450 nm पर निर्धारित किया गया।™माइक्रोप्लेट रीडर (पर्किनएल्मर)।

2.4. एंटीऑस्टियोआर्थराइटिस गतिविधि का मूल्यांकनइन विवो

2.4.1. पशु

नर स्प्रैग-डॉली चूहों (7 सप्ताह के) को समताको इंक. (ओसान, कोरिया) से खरीदा गया और 12 घंटे के प्रकाश/अंधेरे चक्र के साथ नियंत्रित परिस्थितियों में रखा गया।डिग्री सेल्सियस और% आर्द्रता। चूहों को प्रयोगशाला आहार और पानी दिया गयायथेच्छसभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाएं राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच) के दिशानिर्देशों के अनुपालन में की गईं और डेजॉन विश्वविद्यालय (डेजॉन, कोरिया गणराज्य) की पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित की गईं।

2.4.2. चूहों में एमआईए के साथ ओए का प्रेरण

अध्ययन शुरू होने से पहले जानवरों को यादृच्छिक रूप से वर्गीकृत किया गया और उपचार समूहों में रखा गया (प्रति समूह)। एमआईए घोल (3 मिलीग्राम/50μ0.9% सलाइन का एल) को केटामाइन और ज़ाइलाज़िन के मिश्रण से प्रेरित एनेस्थीसिया के तहत सीधे दाहिने घुटने के इंट्रा-आर्टिकुलर स्पेस में इंजेक्ट किया गया। चूहों को यादृच्छिक रूप से चार समूहों में विभाजित किया गया: (1) बिना एमआईए इंजेक्शन वाला सलाइन समूह, (2) एमआईए इंजेक्शन वाला एमआईए समूह, (3) एमआईए इंजेक्शन के साथ एसडीई-उपचारित समूह (200 मिलीग्राम/किग्रा), और (4) एमआईए इंजेक्शन के साथ इंडोमेथेसिन- (आईएम-) उपचारित समूह (2 मिलीग्राम/किग्रा)। चूहों को एमआईए इंजेक्शन से 1 सप्ताह पहले 4 सप्ताह तक एसडीई और आईएम के साथ मौखिक रूप से प्रशासित किया गया था। इस अध्ययन में उपयोग की गई एसडीई और आईएम की खुराक पिछले अध्ययनों में प्रयुक्त खुराक पर आधारित थी।10,13,14].

2.4.3. पिछले पंजे के भार-असर वितरण का मापन

ओए प्रेरण के बाद, पिछले पंजों की भार वहन क्षमता का मूल संतुलन बिगड़ गया। भार वहन सहनशीलता में परिवर्तन का मूल्यांकन करने के लिए एक अशक्तता परीक्षक (लिंटन उपकरण, नॉरफ़ॉक, यूके) का उपयोग किया गया। चूहों को सावधानीपूर्वक मापक कक्ष में रखा गया। पिछले अंग द्वारा लगाए गए भार वहन बल का 3 सेकंड की अवधि में औसत निकाला गया। भार वितरण अनुपात की गणना निम्नलिखित समीकरण द्वारा की गई: [दाएँ पिछले अंग पर भार/(दाएँ पिछले अंग पर भार + बाएँ पिछले अंग पर भार)] × 100 [15].

2.4.4. सीरम साइटोकाइन स्तरों का मापन

रक्त के नमूनों को 1,500 ग्राम पर 4°C पर 10 मिनट तक सेंट्रीफ्यूज किया गया; फिर सीरम एकत्र किया गया और उपयोग होने तक -70°C पर संग्रहीत किया गया। IL-1 का स्तरβ, आईएल-6, टीएनएफ-α, और सीरम में PGE2 को निर्माता के निर्देशों के अनुसार R&D सिस्टम (मिनियापोलिस, एमएन, यूएसए) से एलिसा किट का उपयोग करके मापा गया।

2.4.5. वास्तविक समय मात्रात्मक आरटी-पीसीआर विश्लेषण

घुटने के जोड़ के ऊतक से TRI अभिकर्मक® (सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, मिसौरी, यूएसए) का उपयोग करके कुल RNA निकाला गया, cDNA में रिवर्स-ट्रांसक्राइब किया गया और SYBR ग्रीन (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, ग्रैंड आइलैंड, न्यूयॉर्क, यूएसए) के साथ TM वन स्टेप RT PCR किट का उपयोग करके PCR-प्रवर्धित किया गया। एप्लाइड बायोसिस्टम्स 7500 रियल-टाइम PCR सिस्टम (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, ग्रैंड आइलैंड, न्यूयॉर्क, यूएसए) का उपयोग करके रियल-टाइम क्वांटिटेटिव PCR किया गया। प्राइमर अनुक्रम और प्रोब-अनुक्रम तालिका में दिखाए गए हैं।1नमूना सीडीएनए के अंशों और GAPDH सीडीएनए की समान मात्रा को निर्माता के निर्देशों (एप्लाइड बायोसिस्टम्स, फोस्टर, कैलिफ़ोर्निया, यूएसए) के अनुसार डीएनए पॉलीमरेज़ युक्त TaqMan® यूनिवर्सल पीसीआर मास्टर मिश्रण से प्रवर्धित किया गया। पीसीआर की स्थितियाँ 50°C पर 2 मिनट, 94°C पर 10 मिनट, 95°C पर 15 सेकंड और 60°C पर 40 चक्रों के लिए 1 मिनट थीं। निर्माता के निर्देशों के अनुसार, लक्ष्य जीन की सांद्रता तुलनात्मक Ct (प्रवर्धन आलेख और सीमा के बीच क्रॉस-पॉइंट पर सीमा चक्र संख्या) विधि का उपयोग करके निर्धारित की गई थी।

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