ऑस्टियोआर्थराइटिस (ओए) दीर्घकालिक दीर्घकालिक अपक्षयी हड्डी संयुक्त रोगों में से एक है जो 65 वर्ष से अधिक की वृद्ध आबादी को प्रभावित करता है।
1]. आम तौर पर, ओए रोगियों में क्षतिग्रस्त उपास्थि, सूजन वाले सिनोवियम और घिसे हुए चोंड्रोसाइट्स का निदान किया जाता है, जो दर्द और शारीरिक परेशानी का कारण बनते हैं।
2]. गठिया का दर्द मुख्य रूप से सूजन के कारण जोड़ों में उपास्थि के ख़राब होने के कारण होता है, और जब उपास्थि गंभीर रूप से क्षतिग्रस्त हो जाती है तो हड्डियाँ एक दूसरे से टकरा सकती हैं जिससे असहनीय दर्द और शारीरिक कठिनाई हो सकती है।
3]. दर्द, सूजन और जोड़ की कठोरता जैसे लक्षणों के साथ सूजन मध्यस्थों की भागीदारी अच्छी तरह से प्रलेखित है। ओए रोगियों में, सूजन संबंधी साइटोकिन्स, जो उपास्थि और सबकोन्ड्रल हड्डी के क्षरण का कारण बनते हैं, श्लेष द्रव में पाए जाते हैं [
4]. ओए रोगियों को आम तौर पर होने वाली दो प्रमुख शिकायतें दर्द और सिनोवियल सूजन हैं। इसलिए वर्तमान OA उपचारों का प्राथमिक लक्ष्य दर्द और सूजन को कम करना है। [
5]. यद्यपि गैर-स्टेरायडल और स्टेरायडल दवाओं सहित उपलब्ध ओए उपचार दर्द और सूजन को कम करने में प्रभावकारिता साबित हुए हैं, इन दवाओं के दीर्घकालिक उपयोग से हृदय, गैस्ट्रो-आंत्र और गुर्दे की शिथिलता जैसे गंभीर स्वास्थ्य परिणाम होते हैं।
6]. इस प्रकार, ऑस्टियोआर्थराइटिस के इलाज के लिए कम दुष्प्रभावों वाली अधिक प्रभावी दवा विकसित करनी होगी।
प्राकृतिक स्वास्थ्य उत्पाद सुरक्षित और आसानी से उपलब्ध होने के कारण तेजी से लोकप्रिय हो रहे हैं [
7]. पारंपरिक कोरियाई दवाओं ने गठिया सहित कई सूजन संबंधी बीमारियों के खिलाफ प्रभावकारिता साबित की है [
8]. ऑकलैंडिया लप्पा डीसी। यह अपने औषधीय गुणों के लिए जाना जाता है, जैसे दर्द से राहत और पेट को आराम देने के लिए क्यूई के परिसंचरण को बढ़ाना, और पारंपरिक रूप से प्राकृतिक एनाल्जेसिक के रूप में उपयोग किया जाता है [
9]. पिछली रिपोर्टों से पता चलता है कि ए. लप्पा में सूजन रोधी गुण होते हैं [
10,
11], एनाल्जेसिक [
12], कैंसर रोधी [
13], और गैस्ट्रोप्रोटेक्टिव [
14] प्रभाव. ए. लैप्पा की विभिन्न जैविक गतिविधियाँ इसके प्रमुख सक्रिय यौगिकों के कारण होती हैं: कॉस्टुनोलाइड, डिहाइड्रोकॉस्टस लैक्टोन, डायहाइड्रोकोस्टुनोलाइड, कॉस्टुसलैक्टोन, α-कोस्टोल, सॉस्यूरिया लैक्टोन और कॉस्टुसलैक्टोन [
15]. पहले के अध्ययनों का दावा है कि कॉस्टुनोलाइड ने लिपोपॉलीसेकेराइड (एलपीएस) में सूजन-रोधी गुण दिखाए, जिसने एनएफ-केबी और हीट शॉक प्रोटीन मार्ग के विनियमन के माध्यम से मैक्रोफेज को प्रेरित किया।
16,
17]. हालाँकि, किसी भी अध्ययन ने ओए उपचार के लिए ए. लप्पा की संभावित गतिविधियों की जांच नहीं की है। वर्तमान शोध में (मोनोसोडियम-आयोडोएसीटेट) एमआईए और एसिटिक एसिड-प्रेरित कृंतक मॉडल का उपयोग करके ओए के खिलाफ ए लप्पा के चिकित्सीय प्रभावों की जांच की गई है।
मोनोसोडियम-आयोडोएसेटेट (एमआईए) का उपयोग जानवरों में दर्द के अधिकांश व्यवहार और ओए की पैथोफिजियोलॉजिकल विशेषताओं को उत्पन्न करने के लिए किया जाता है।
18,
19,
20]. जब घुटने के जोड़ों में इंजेक्शन लगाया जाता है, तो एमआईए चोंड्रोसाइट चयापचय को अव्यवस्थित कर देता है और सूजन और सूजन संबंधी लक्षण उत्पन्न करता है, जैसे कि उपास्थि और सबकोन्ड्रल हड्डी का क्षरण, ओए के प्रमुख लक्षण [
18]. एसिटिक एसिड से प्रेरित लेखन प्रतिक्रिया को व्यापक रूप से जानवरों में परिधीय दर्द के अनुकरण के रूप में माना जाता है जहां सूजन संबंधी दर्द को मात्रात्मक रूप से मापा जा सकता है [
19]. माउस मैक्रोफेज सेल लाइन, RAW264.7, सूजन के लिए सेलुलर प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए लोकप्रिय रूप से उपयोग किया जाता है। LPS के साथ सक्रिय होने पर, RAW264 मैक्रोफेज सूजन मार्गों को सक्रिय करते हैं और कई सूजन मध्यस्थों को स्रावित करते हैं, जैसे TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, और IL-6 [
20]. इस अध्ययन ने एमआईए पशु मॉडल, एसिटिक एसिड-प्रेरित पशु मॉडल और एलपीएस-सक्रिय RAW264.7 कोशिकाओं में ओए के खिलाफ ए. लप्पा के एंटी-नोसिसेप्टिव और एंटी-इंफ्लेमेटरी प्रभावों का मूल्यांकन किया है।
2। सामग्री और विधि
2.1. संयंत्र के लिए सामग्री
ए. लप्पा डीसी की सूखी जड़। प्रयोग में प्रयुक्त दवा एपुलिप फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड, (सियोल, कोरिया) से खरीदी गई थी। इसकी पहचान प्रोफेसर डोंगहुन ली, हर्बल फार्माकोलॉजी विभाग, कोरियन मेडिसिन के कर्नल, गाचोन विश्वविद्यालय द्वारा की गई थी, और वाउचर नमूना संख्या 18060301 के रूप में जमा की गई थी।
2.2. ए. लप्पा अर्क का एचपीएलसी विश्लेषण
ए. लप्पा को एक रिफ्लक्स उपकरण (आसुत जल, 100 डिग्री सेल्सियस पर 3 घंटे) का उपयोग करके निकाला गया था। निकाले गए घोल को कम दबाव वाले बाष्पीकरणकर्ता का उपयोग करके फ़िल्टर और संघनित किया गया था। -80 डिग्री सेल्सियस के तहत फ्रीज-सुखाने के बाद ए लप्पा अर्क की उपज 44.69% थी। ए. लप्पा का क्रोमैटोग्राफ़िक विश्लेषण 1260 इन्फिनिटीⅡ एचपीएलसी-सिस्टम (एगिलेंट, पाल अल्टो, सीए, यूएसए) का उपयोग करके जुड़े एचपीएलसी के साथ किया गया था। रंगीन पृथक्करण के लिए, EclipseXDB C18 कॉलम (4.6 × 250 मिमी, 5 µm, एगिलेंट) का उपयोग 35 डिग्री सेल्सियस पर किया गया था। कुल 100 मिलीग्राम नमूने को 50% मेथनॉल के 10 एमएल में पतला किया गया और 10 मिनट के लिए सोनिकेट किया गया। नमूनों को 0.45 माइक्रोन के सिरिंज फिल्टर (वाटर्स कॉर्प, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) के साथ फ़िल्टर किया गया था। मोबाइल चरण संरचना 0.1% फॉस्फोरिक एसिड (ए) और एसीटोनिट्राइल (बी) थी और कॉलम को निम्नानुसार निक्षालित किया गया था: 0-60 मिनट, 0%; 60-65 मिनट, 100%; 65-67 मिनट, 100%; 67-72 मिनट, 1.0 एमएल/मिनट की प्रवाह दर के साथ 0% विलायक बी। 10 μL की इंजेक्शन मात्रा का उपयोग करके प्रवाह को 210 एनएम पर देखा गया। विश्लेषण तीन प्रतियों में किया गया था।
2.3. पशु आवास एवं प्रबंधन
5 सप्ताह की आयु के नर स्प्रैग-डावले (एसडी) चूहों और 6 सप्ताह की आयु के नर आईसीआर चूहों को समताको बायो कोरिया (ग्योंगगी-डो, कोरिया) से खरीदा गया था। जानवरों को स्थिर तापमान (22 ± 2 डिग्री सेल्सियस) और आर्द्रता (55 ± 10%) और 12/12 घंटे के प्रकाश/अंधेरे चक्र का उपयोग करके एक कमरे में रखा गया था। प्रयोग शुरू होने से पहले जानवरों को एक सप्ताह से अधिक समय तक स्थिति से परिचित कराया गया था। जानवरों को चारे और पानी की पर्याप्त आपूर्ति थी। गैचोन विश्वविद्यालय (GIACUC-R2019003) में जानवरों की देखभाल और हैंडलिंग के लिए मौजूदा नैतिक नियमों का सभी पशु प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं में सख्ती से पालन किया गया था। अध्ययन को अन्वेषक-अंधा और समानांतर परीक्षण के रूप में डिजाइन किया गया था। हमने पशु प्रायोगिक आचार समिति के दिशानिर्देशों के अनुसार इच्छामृत्यु पद्धति का पालन किया।
2.4. एमआईए इंजेक्शन और उपचार
चूहों को बेतरतीब ढंग से 4 समूहों में विभाजित किया गया था, अर्थात् शम, नियंत्रण, इंडोमिथैसिन और ए लप्पा। 2% आइसोफ्लोरेन O2 मिश्रण के साथ संवेदनाहारी होने के कारण, प्रयोगात्मक OA प्राप्त करने के लिए चूहों को घुटने के जोड़ों में इंट्रा-आर्टिकुलर रूप से 50 μL MIA (40 mg/m; सिग्मा-एल्ड्रिच, सेंट लुइस, MO, यूएसए) का उपयोग करके इंजेक्ट किया गया था। उपचार निम्नानुसार आयोजित किए गए: नियंत्रण और दिखावटी समूहों को केवल AIN-93G मूल आहार के साथ बनाए रखा गया था। केवल, इंडोमेथेसिन समूह को एआईएन-93जी आहार में शामिल इंडोमेथेसिन (3 मिलीग्राम/किग्रा) प्रदान किया गया था और ए. लैप्पा 300 मिलीग्राम/किग्रा समूह को ए. लैप्पा (300 मिलीग्राम/किग्रा) के साथ पूरक एआईएन-93जी आहार सौंपा गया था। दैनिक आधार पर 15-17 ग्राम प्रति 190-210 ग्राम शरीर के वजन की दर से ओए प्रेरण के दिन से 24 दिनों तक उपचार जारी रखा गया।
2.5. भार वहन माप
OA प्रेरण के बाद, चूहों के पिछले अंगों की वजन-वहन क्षमता का मापन अक्षमता-मीटरटेस्टर 600 (आईआईटीसी लाइफ साइंस, वुडलैंड हिल्स, सीए, यूएसए) के साथ निर्धारित कार्यक्रम के अनुसार किया गया था। पिछले अंगों पर वजन वितरण की गणना की गई: वजन सहने की क्षमता (%)
